资料简介
专题5DNA和蛋白质技术DNA的粗提取与鉴定多聚酶链式反应扩增DNA片段血红蛋白的提取与分离
课题1DNA的粗提取与鉴定课题目标:尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取;了解DNA的理化性质,理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。课题重点DNA的粗提取和鉴定方法。
本节问题:1、DNA的粗提取和鉴定根据的原理是什么?1)DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同。具体见P54图5-1。2)利用DNA不溶于酒精但细胞中某些蛋白质溶于酒精的性质可使DNA与蛋白质分离得到初步纯化的DNA。3)在沸水中DNA遇二苯胺呈现蓝色反应。
2、DNA粗提取的方法步骤怎样?有什么主要注意问题?注意问题:1)材料要选用DNA含量较高的生物组织;2)整个实验中三次用到2mol/L的NaCl溶液;3)酒精最好用95%的冷酒精;4)二苯胺试剂最好现配现用,如果从冰箱取出,用时要先摇匀;5)加蒸馏水或加入酒精用玻棒搅拌时,动作要轻缓且朝一个方向。
3、解决教材其他练习题。反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质的原因是:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶于低盐溶液中的物质。
练习巩固1、向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是A减小;减小B增大;增大C先减小后增大D减小;增大2、欲使溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,最有效的办法是A加蒸馏水B加矿泉水C加清水D加生理盐水
3、与析出DNA粘稠物有关的叙述,不正确的是A操作时缓慢滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度B操作时用玻棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整C加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度D当丝状粘稠物不再增加时,NaCl溶液的浓度可以认为是0.14mol/L4、你能采用其他方法对DNA进行鉴定吗?1)用甲基绿染液。结果丝状呈现绿色。详见(必修1P26)
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