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2021学年第二学期台州九校联盟期中联考高二年级生物学科试题一、选择题1.2017年11月27日，世界上首例体细胞克隆猴“中中”和“华华”在我国诞生。克隆动物一般是指将动物体细胞核移植到去核卵母细胞中培育成的新个体，该技术主要是利用了动物细胞核的（）A.全能性B.复杂性C.多样性D.统一性【1题答案】【答案】A2.无菌技术包括以下几个方面的叙述，正确的是（）A.无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物B.煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子C.为了防止污染，接种环经酒精灯火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.紫外线照射前，打开紫外灯和过滤风开关，灭菌30min【2题答案】【答案】D3.下列各组物质组成中，不全部属于哺乳动物胚胎培养液成分的是A.氨基酸、核苷酸、无机盐、激素B.血清、激素、维生素、有机盐C.核苷酸、维生素、血清、无机盐D.有机盐、维生素、氨基酸、生长素【3题答案】【答案】D4.如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（）A.步骤倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置B.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
C.操作③到④的过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理D.用接种环在平板上划线时注意不能将培养基划破【4题答案】【答案】A5.动物细胞融合属于动物细胞工程的技术手段之一，下列有关动物细胞融合的叙述正确的是（ ）A.动物细胞融合产生的细胞称为重组细胞B.融合后形成的细胞为单核或多核细胞C.常用的诱导融合的生物诱导剂是聚乙二醇、灭活的病毒等D.也称细胞杂交，可由两个或多个动物细胞结合成一个细胞【5题答案】【答案】D6.下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（ ）A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化【6题答案】【答案】C7.下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（）A.胚状体、芽、愈伤组织可用于制作人工种子B.菊花茎段在生根培养基上获得丛状苗，然后再进行分株培养C.植物愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞D.愈伤组织发育成胚状体的过程是器官发生途径
【7题答案】【答案】A8.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是A.纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理一一酶的专一性B.植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性C.原生质体融合和动物细胞融合一一生物膜的流动性D.紫草细胞培养和动物细胞培养——细胞分裂【8题答案】【答案】B9.下列技术无法通过酶解法实现的是（）A.制备动物组织单细胞悬液B.贴壁生长细胞系的解离C.植物细胞制备原生质体D.早期囊胚进行胚胎分割【9题答案】【答案】D10.红薯是我国种植面积较大一类作物，但长期以来的连种，造成了红薯品种退化，产量和品质逐年下降，其主要原因是所用的种薯携带了大量的病毒。研究人员利用现代生物技术，对红薯进行脱毒培养。下列说法错误的是（）A.可以选择红薯茎尖或根尖的分生区作为外植体B.若选择的外植体体积过大，可能会导致脱毒率降低C.培育红薯脱毒苗的过程中，需要适时调整激素的比例D.培育红薯脱毒苗过程中，激素使用不当会导致性状分离【10题答案】【答案】D11.江南水乡盛产黄酒，传统的黄酒酿造通常以谷物做原料，经高温糖化（将淀粉分解）后添加酒曲发酵而成。下列相关叙述错误的是（ ）A.酒曲中含有丰富的酵母菌，添加酒曲相当于接种B.高温糖化既能消灭杂菌又有利于酵母菌对糖类的利用C.随着发酵时间的推进，酒精的产生速率先上升后趋于稳定D.酵母菌中相关酶活性的降低限制了酒精度数的持续升高【11题答案】
【答案】C12.下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（）A.动植物细胞培养都需要经过脱分化处理B.制备原生质体时，要防止细胞破裂C.组织培养过程中脱分化和再分化使用相同培养基D.实现植物原生质体融合的结构基础是植物细胞膜的流动性【12题答案】【答案】D13.下列关于限制性内切核酸酶的叙述错误的是（）A.绝大多数的限制酶由原核细胞中获取B.每一种限制性内切核酸酶只能识别特定的核苷酸序列C.限制酶的作用位点是相邻核苷酸之间的氢键D.同一种限制酶切割不同的DNA分子可产生碱基互补配对的粘性末端【13题答案】【答案】C14.白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。以白菜为母本、甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜—甘蓝”杂种幼苗。下列说法正确的是（）A.白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在生殖隔离B.“白菜—甘蓝”杂种幼苗的染色体可用苏丹III染色C.人工诱导产生四倍体“白菜—甘蓝”，这种变异属于基因突变D.雌蕊离体培养获得“白菜—甘蓝”杂种幼苗不能说明植物细胞具有全能性【14题答案】【答案】A15.基因工程受体细胞可以是细菌、动物或者植物细胞，因此将目的基因导入受体细胞的方法也有所差异。下列叙述错误的是（）A.导入植物细胞常采用农杆菌转化法B.基因枪法可将目的基因导入植物叶绿体等细胞器中C.大肠杆菌作为受体细胞时，通常需要使用钙离子处理D.显微注射可以将目的基因直接注射给动物体受精卵细胞【15题答案】
【答案】D16.“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列叙述正确的是（ ）A.基因工程中通过标记基因筛选出的细胞一定都含有重组质粒B.在诱变育种中需要通过筛选才能得到数量较多的有利变异C.植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的杂种细胞需进行筛选D.单克隆抗体制备过程中对杂交瘤细胞进行一次抗体检验即可大量获得阳性细胞克隆【16题答案】【答案】C17.下列关于用塑料瓶制果酒和果醋的叙述，正确的是（）A.为了提高果酒的产出量，果汁应尽量装满发酵瓶B.醋酸发酵阶段应封闭瓶口，防止杂菌污染C.果酒发酵过程中若看不到气泡冒出，应加入更多的葡萄，使发酵作用尽快发生D.果酒制成后，可将装置转移至温度较高的环境中制果醋【17题答案】【答案】D18.培养胡萝卜根组织可获得试管苗，其过程如图所示。下列叙述错误的是（）A.用胡萝卜根段培养成试管苗，体现了细胞的全能性B.⑤⑥过程所需的生长素和细胞分裂素的比例不同C.愈伤组织由一团正方形排列紧密的薄壁细胞组成D.经组织培养得到的植株一般可保持原品种的遗传特性【18题答案】【答案】C19.下列有关基因工程的叙述正确的是（）A.农杆菌的Ti质粒上的T-DNA片段能整合到植物染色体DNA中
B.基因工程基本原理是让目的基因在宿主细胞中稳定存在和高效复制C.用氯化钙处理植物细胞，可增加细胞壁的通透性D.将乙肝抗原导入酵母菌可以获得能生产乙肝疫苗的工程菌【19题答案】【答案】A20.单克隆抗体在生物工程和临床医学上有着极为重要的地位和巨大的应用。下列有关单克隆抗体技术及其应用的叙述，正确的是（）A.该技术利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理B.将选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞直接用于生产单克隆抗体C.利用抗原—抗体杂交技术可筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞D.“生物导弹”中的单克隆抗体能特异性的结合抗原并杀死癌细胞【20题答案】【答案】C21.植物原生质体培养技术是以细胞全能性为理论基础建立的一种离体培养技术，首先用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁得到原生质体，然后向原生质体中导入抗病基因或含有抗病基因的DNA片段，再将其转移至合适的环境中，再生细胞壁、形成愈伤组织、得到胚状体，最终发育成完整的植株，下列说法正确的是（）A.该培养过程中，细胞壁的再生需要经过内质网的作用B.诱导形成愈伤组织的培养基中生长素所占比值一定高于细胞分裂素C.将导入外源基因的原生质体培养至愈伤组织，体现了植物细胞的全能性D.从原生质体到愈伤组织的过程中，基因进行了选择性表达【21题答案】【答案】D22.四种限制酶的切割位点如图所示，下列叙述错误的是（）A.上图中EcoRⅠ、PstⅠ两种酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA连接酶连接B.图中SmaⅠ、EcoRV两种酶切割后的DNA片段，可以用T4DNA连接酶连接
C.DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段连接的化学键是磷酸二酯键D.限制酶能识别特定的核苷酸序列，具有专一性，不同的限制酶切割不能产生相同的黏性末端【22题答案】【答案】D23.从目标生物提取分离DNA，是基因工程操作的基础。下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（）A.95%的冷酒精能除去蛋白质形成含杂质较少的DNAB.沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂，颜色呈蓝色C.香蕉、新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取D.EDTA能抑制DNA酶活性，防止核DNA被酶解【23题答案】【答案】C24.植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，现有两种烟草硝酸还原酶缺失突变体，为探究两种突变体的突变是否在同一基因位点上，研究人员将两种突变体进行植物体细胞杂交。下列分析正确的是（）A.两种突变体均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长B.诱导两种突变体进行植物体细胞杂交时应先用胶原蛋白酶酶解得到原生质体C.细胞膜融合是诱导原生质体融合完成的标志D.若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长，说明两种突变体的突变位点相同【24题答案】【答案】A25.2018年1月30日，加拿大食品检验局批准了第三种耐褐变转基因苹果品种上市。研究人员通过RNA沉默技术，特异性降低苹果细胞内多酚氧化酶基因的表达水平，使苹果被切开后即使长时间暴露在空气中也不会被氧化褐变。如图是此过程原理示意图，下列有关的叙述错误的是
A.细胞内多酚氧化酶基因的表达包括图示中的①②过程B.将目的基因成功导入苹果细胞中需限制酶、DNA连接酶和RNA聚合酶C.“RNA沉默”的含义是mRNA不能翻译产生多酚氧化酶D.目的基因的表达序列与多酚氧化酶基因的表达序列互补，且要同时在同一细胞内表达【25题答案】【答案】B二、非选择题部分26.圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为氨，用于合成蛋白质等含氮的有机物，是异养需氧型的原核生物。某兴趣小组对土壤中的圆褐固氮菌进行计数，请回答相关问题：（1）要想获得圆褐固氮菌的菌种最好选择____________（填“表层”或“深层”）的土壤。（2）在培养圆褐固氮菌的培养基中不需要加入的成分是____________；该培养基从功能上划分，属于____________培养基。设置LB固体培养基作为对照实验，其成分应包括：蛋白胨、酵母提取物、NaCl，__________、______________。（3）在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列器材不需要的是_______（填序号）。①酒精灯②接种环③高压蒸汽灭菌锅④封口膜（4）本实验采用的接种方法是______________，其统计结果一般用数而不是活菌数来表示；接种好的平板放入38℃恒温箱中培养，每隔12h统计一次，待数目稳定时的记录作为结果，其原因是_________________。（5）将1ml土样稀释10000倍，在3个平板上分别接入0.1ml稀释液；经适当培养后的菌落数分别是59、57、58，则样品中菌落的数量为___________个/mL。【26题答案】【答案】（1）表层（2）①.氮源②.选择③.琼脂④.蒸馏水##水（3）②（4）①.稀释涂布平板法②.菌落防止因培养时间不足导致遗漏菌落数目
（5）5.8×10628.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下列问题：（1）过程①常用的酶是________________，细胞融合完成的标志是__________________。（2）植物体细胞杂交依据的生物学原理有________________________。（3）植物原生质体融合过程常利用化学试剂__________诱导融合，与动物细胞融合相比，该过程不能使用的融合方法是___________。在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到____________种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况），当观察到_____________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。（4）过程④中的培养基常添加的植物激素是_____________________________。（5）若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含____________条染色体。【28题答案】【答案】（1）①.纤维素酶和果胶酶②.杂种细胞再生出新的细胞壁（2）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性（3）①.#聚乙二醇#PEG#②.灭活的病毒③.3④.融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光（或既有马铃薯的染色体又有番茄的染色体）（4）生长素和细胞分裂素（5）2（m＋n）30.人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题。
（1）制备单克隆抗体常用动物细胞工程技术有_________和_________。（2）在制备单克隆抗体过程中，首先要将纯化HCG注入小鼠体内，其目的是从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得_________。（3）在图中HAT培养基上，只有_________细胞才能生长，培养该细胞除了充足的营养、适宜的温度和PH以外，还需要有_________的环境和适宜的气体环境。（4）选出的杂交瘤细胞的特点是既能_________，又能产生_________，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和_________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需特异抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，从_________或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，主要的优点是_________、_________（答两点即可）。【30题答案】【答案】（1）①.动物细胞培养②.动物细胞融合（2）B淋巴细胞（浆细胞）（3）①.杂交瘤②.无菌无毒的环境（4）①.无限增殖②.专一的抗体③.（专一）抗体检测④.细胞培养液（5）①.特异性强②.灵敏度高，并可能大量制备32.人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的部分过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：
（1）一个基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、复制原点、____________________、__________________________等。若选用牛作为转基因动物可将人乳铁蛋白基因与_________________________的启动子等调控组件重组在一起，可通过____________________方法将基因表达载体导入受精卵中，然后使其发育成转基因动物。（2）据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含____________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_______________________________。（3）若要检测转基因动物DNA上是否插入了目的基因，检测方法是采用DNA分子杂交技术，即用_______________标记的_________________________作探针，如果显示出杂交带，则表明目的基因已插入染色体DNA中。（4）利用转基因大肠杆菌（工程菌）不能生产有活性的人乳铁蛋白，这是因为________________________________。【32题答案】【答案】（1）①.标记基因②.目的基因③.牛乳腺蛋白基因④.显微注射（2）①.氨苄青霉素②.用限制酶切割后破坏了Tetr基因，但不会破坏Ampr基因，导入重组质粒的受体细胞，能在含氨苄青霉素的培养基上生存下来（3）①.放射性同位素（或荧光物质等）②.人乳铁蛋白基因（目的基因）（4）大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，不具备加工人乳铁蛋白的能力
34.为研究家蚕K蛋白的抗凋亡作用，研究人员提出了下面的实验思路，请根据以下提供的材料与用具，以DNA片段化相对值（AU值）为指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析。材料与用具：家蚕BmN细胞悬液，H2O2（对细胞凋亡有影响），K蛋白溶液，培养瓶，培养液M，CO2培养箱等。（要求与说明：K蛋白是一种家蚕血淋巴中的蛋白质，血淋巴类似于人体血浆；BmN细胞是家蚕的一种正常体细胞；培养液M是家蚕BmN细胞的完全培养液；AU值测定的具体方法不做要求；不考虑溶液溶剂对实验的影响；实验条件适宜）回答下列问题：（1）完善实验思路：①实验分组与处理：甲组：家蚕BmN细胞十培养液M；乙组：家蚕BmN细胞+K蛋白溶液+培养液M：丙组：家蚕BmN细胞+H2O2+培养液M；丁组：家蚕BmN细胞+H2O2+培养液M，培养4小时后，加入________；②每组设置3个重复，置于CO2培养箱中；③培养24小时后，同时测定_________，统计并分析所得数据。（2）预测实验结果____（设计一个坐标，用柱形图表示检测结果）。（3）分析和讨论：①实验以DNA片段化相对值（AU值）为指标的原因是_____；H2O2的作用是________。②推测培养液M中________（含有/不含有）动物血清，原因是________。③在实验操作正确，溶液正常的情况下，若甲组与乙组检测结果相同，说明_______。【34题答案】【答案】①.K蛋白溶液②.甲、乙、丙、丁四组的AU③.
④.细胞凋亡过程伴随DNA片段化⑤.诱导（促进）细胞凋亡⑥.不含有⑦.动物血清成分复杂，可能含有影响细胞凋亡的物质，影响实验结果⑧.K蛋白不影响正常细胞的凋亡
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